嚙齒動物快速學會恐懼反應,并長久記住。因此,它是用于研究實驗室嚙齒動物的記憶和恐懼的強大且穩(wěn)固行為。在恐懼研究中常見的測量反應為凝滯(警惕不動)和驚跳反射。諾達思的恐懼制約系統(tǒng)設置包括使用基于模型(恐懼條件反射和線索恐懼條件反射)的動物運動軌跡追蹤系統(tǒng)(EthoVision XT)進行實驗的所有組件。
實驗通常分為訓練和測試兩個階段:
訓練階段:將動物置于特定環(huán)境中,先給予一個中性條件刺激(如聲音、燈光),緊接著施加一次短暫的足底電擊(非條件刺激)。經(jīng)過多次重復配對后,動物會將原本無害的刺激與疼痛聯(lián)系起來,形成條件性恐懼記憶。
測試階段:在訓練后的24小時或更長時間后,再次將動物放入相同或改變的環(huán)境中,僅給予條件刺激(如聲音)或不給予任何刺激,觀察其是否表現(xiàn)出僵立行為。
標準操作流程(以小鼠為例)
1.訓練階段(第1天)
將小鼠放入恐懼箱中適應2分鐘,記錄基線僵立時間。
進行4-6輪“聲音+電擊”配對訓練:
播放30秒聲音(條件刺激)
在聲音結束前2秒施加2秒電擊(非條件刺激)
每輪間隔1-4分鐘,總時長約28分鐘。
2.測試階段(第2天)
情境恐懼測試:將小鼠重新放入原訓練箱中,不給予聲音或電擊,觀察5分鐘內的僵立行為,評估對環(huán)境的記憶。
聲音恐懼測試:將小鼠置于新環(huán)境中(改變形狀、氣味、光線等),先觀察3分鐘,再播放30秒聲音,繼續(xù)觀察3分鐘,評估對聲音線索的恐懼記憶。
3.恐懼消退與記憶保持測試(可選)
連續(xù)多日重復聲音刺激但不給予電擊,觀察僵立行為是否逐漸減少,評估恐懼記憶的消退能力。
可在第1、3、7天進行保持測試,計算消退保持成績。