實驗動物與分組
研究對象選用216只5周齡斷奶Hyla兔(僅選用雌性兔子,以排除性別差異對脂肪代謝的影響),隨機分為2組,每組108只。
白天喂養(yǎng)組(DF):早上7:00(日出時間)喂食,全天自由采食;
夜間限制性喂養(yǎng)組(NRF):下午5:00(日落時間)喂食,僅在此時間至次日早上7:00期間可采食。
動物行為學監(jiān)測
使用紅外攝像頭全天候記錄兔子行為,從每組選取3只兔子進行重點觀察,從實驗第88天至92天(連續(xù)5天)。研究的行為學監(jiān)測部分采用了諾達思的行為觀察記錄分析系統(tǒng)(The Observer XT),對以下行為進行編碼和記錄:
采食行為
飲水行為
行走行為
躺臥行為
梳理毛發(fā)行為
其他監(jiān)測
除了行為學監(jiān)測,研究人員使用獸醫(yī)直腸電子體溫計測量直腸溫度。除此之外,在兔子14周齡時,每組各取72只兔子,在24小時內(nèi)每隔4小時,采集血清、肝臟、肌肉和脂肪組織樣本。測定包括三碘甲狀腺原氨酸和甲狀腺素的血清濃度。測量血清中糖皮質(zhì)激素和瘦素水平,以及總膽固醇。對肝臟組織橫向冷凍切片進行中性脂質(zhì)含量進行檢測。測量肝臟甘油三酯、總膽固醇和β-羥基丁酸水平。檢測脂肪組織中PPARγ蛋白的表達水平。測量分析肌肉內(nèi)脂肪比例。另外,檢測肝臟、肌肉和脂肪組織中生物鐘基因和脂質(zhì)代謝相關(guān)基因的表達水平等。